Browsing by Author "Gadgil, Ankur"
Now showing 1 - 1 of 1
Results Per Page
Sort Options
Item Wpływ mutacji FUS związanych z ALS na aktywność U7 snRNP i ekspresji genów kanonicznych histonów rdzeniowych w komórkach neuronalnych(2022) Gadgil, Ankur; Raczyńska, Katarzyna Dorota. PromotorStwardnienie zanikowe boczne (ang. ALS, amyotrophic lateral sclerosis) to choroba neurodegeneracyjna, która polega na postępującej utracie górnych i dolnych neuronów ruchowych układu nerwowego. W 90 do 95% przypadków ALS jest klasyfikowany jako sporadyczny ALS (sALS), autosomalna dominująca postać rodzinnego ALS (fALS) stanowi pozostałe 5 do 10% przypadków. Za postać fALS odpowiadają mutacje w różnych genach, między innymi w genie FUS. FUS jest białkiem jądrowym podlegającym konstytutywnej ekspresji, zaangażowanym w naprawę DNA i regulację transkrypcji, splicing RNA i eksport RNA do cytoplazmy. Mutacje FUS związane z ALS (ALS-FUS) występują głównie w zachowawczym regionie końca C białka i prowadzą do nieprawidłowej lokalizacji białka i tworzenia cytoplazmatycznych agregatów. Wcześniej wykazaliśmy, że białko FUS oddziałuje z cząstką U7 snRNP i bierze udział w regulacji transkrypcji i wydajności dojrzewania końca 3' genów histonów zależnych od replikacji (RDH, ang. replication dependant histones). Bazując na dostępnych danych i naszych wcześniejszych obserwacjach, za cel pracy doktorskiej obrałem analizę wpływu mutacji ALS-FUS na aktywność U7 snRNP oraz efektywność transkrypcji i dojrzewanie pre-mRNA kanonicznych histonów rdzeniowych, jako mechanizmu molekularnego leżącego u podstaw ALS. Wyniki, jakie uzyskałem na modelu komórkowym i pierwotnych neuronów szczurów wskazują, że mutacje ALS-FUS prowadzą do błędnej lokalizacji w agregatach cytoplazmatycznych wraz z białkiem FUS również cząstki U7 snRNP. To cytoplazmatyczne uwięzienie ALS-FUS wraz z U7 snRNP ma następnie znaczący wpływ na aktywność transkrypcyjną i nieprawidłowe dojrzewanie końca 3' pre-mRNA RDH. W proliferujących komórkach neuroblastoma transfekowanych mutantami ALS-FUS zaobserwowałem zahamowanie transkrypcji genów RDH i upośledzenie dojrzewania końca 3' ich pre-mRNA. Jednocześnie, w terminalnie zróżnicowanych komórkach nie zaobserwowałem zaburzenia dojrzewania końca 3' pre-mRNA, ale znaczne obniżenie poziomu transkryptów z uwagi na zahamowaną transkrypcję. Uzyskane wyniki wskazują, że cząstka U7 snRNP jest jedną z cząstek snRNP, na których aktywność wpływają mutacje ALS-FUS, w efekcie prowadząc do szeregu zaburzeń, od nieefektywnego splicingu po zaburzoną obróbkę transkryptów RDH. Niewątpliwie, istnieje jeszcze więcej parametrów, które nie zostały wciąż zbadane. Niemniej, podsumowując dostępne dane, zwiększenie uszkodzeń DNA i zakłócone dojrzewanie pre-mRNA genów RDH spowodowane mutacjami ALS-FUS może prowadzić do niestabilności genomu i może być mechanizmem molekularnym leżącym u podstaw ALS.