Browsing by Author "Pietrykowska, Halina"
Now showing 1 - 1 of 1
Results Per Page
Sort Options
Item Identyfikacja i charakterystyka mikroRNA biorących udział w procesie rozmnażania generatywnego u Marchantia polymorpha(2019) Pietrykowska, Halina; Szweykowska-Kulińska, Zofia. PromotorGłównym celem projektu była identyfikacja cząsteczek mikroRNA zaangażowanych w rozmnażanie płciowe wątrobowca - Marchantia polymorpha. Do tej pory zidentyfikowano mikrotranskryptom dwóch gatunków wątrobowców: Pellia endiviifolia i M. polymorpha. W tej pracy doktorskiej przeprowadziłam głębokie sekwencjonowanie małych cząsteczek RNA (sRNA NGS) w celu zidentyfikowania zestawu miRNA specyficznych tylko dla wątrobowców,a następnie poziom ekspresji wybranych rodzin miRNA potwierdzono techniką northern blot. W projekcie wykonano również głębokie sekwencjonowanie degradomu Marchantia, które pozwoliło na znalezienie docelowych mRNA dla wybranych „wątrobowcowo-specyficznych” rodzin miRNA. Spośród wszystkich analizowanych cząsteczek miRNA szczególną uwagę zwraca Mpo-miR11889, który w tej pracy został przedstawiony bardziej szczegółowo. MiR11889 ulega ekspresji na wykrywalnym poziomie tylko w plemniach Marchantia. Jego docelowym mRNA jest transkrypt genu fosfatazy o podwójnej specyficzności DUSP12 (MpDUSP12). Mutanty CRISPR/Cas9 ∆MIR11889ge roślin męskich wykazują zaburzenia odnośnie lokalizacji plemni w anteridioforach Marchantia. Mutanty z nadekspresją białka MpDUSP12 wykazują podobne nieprawidłowości w rozmieszczeniu plemni. Eksperymenty zapłodnienia z użyciem roślin męskich i żeńskich ∆MIR11889ge wykazały, że wzrost poziomu MpDUSP12 w Marchantia wpływa radykalnie obniża wydajność tworzenia sporangium i prawidłowy rozwój sporofitu i sporów. Wyniki pracy zwracają uwagę na istotną rolę fosfatazy DUSP12 w rozmnażaniu generatywnym wątrobowców.